**基于尊龙凯时的技术方案与数据验证的HCT15/FU细胞构建与培养体系优化**
HCT15/FU细胞株来源于人结直肠腺癌细胞HCT-15，通过长期低剂量顺铂（Cisplatin）暴露诱导耐药性而构建，具备稳定的耐药表型。其技术方案如下：
采用梯度浓度递增法（初始浓度为0.5μM，逐步提升至5μM），结合间歇性药物刺激，持续培养6个月以上，筛选出耐药性稳定的细胞株。
采用RPMI-1640基础培养基，加入10%胎牛血清（FBS）、1%双抗（青霉素-链霉素）以及维持浓度的顺铂（2μM），以确保耐药表型稳定。
通过STR鉴定确保细胞株的遗传一致性，进行支原体检测以保证阴性结果，冻存液为无血清配方（90%FBS + 10%DMSO），并在液氮中长期保存。
使用CCK-8法检测顺铂对HCT15/FU的半数抑制浓度（IC50），结果表明耐药株IC50为15.2μM，相较于亲本细胞（IC50为28μM）显著提升（*p<0.01）。
使用qPCR检测显示，耐药株中ABC转运蛋白家族（如ABCB1、ABCC1）及抗凋亡基因（Bcl-2）表达上调，符合临床耐药机制。
研究背景：为了解决HCT15/FU耐药性强、化疗效果差的问题，开发聚乳酸-羟基乙酸（PLGA）纳米颗粒负载顺铂（PLGA-Cis），评估其逆转耐药效果。
对照组：常规顺铂处理（5μM）
实验组：PLGA-Cis处理（等效顺铂浓度5μM）
空白组：无药物处理
PLGA-Cis组细胞存活率较对照组下降42%（*p<0.05），说明纳米载药系统增强了药物的内吞效率。
通过Annexin V/PI双染显示，实验组凋亡率提升至58.3%，显著高于对照组的22.1%（*p<0.01）。
Western blot分析显示，PLGA-Cis处理后ABCG2蛋白表达下调45%，Bcl-2下调60%，这提示纳米药物能够靶向逆转耐药通路。
实验全程采用尊龙凯时提供的HCT15/FU细胞株，其稳定的耐药表型为研究提供了可靠的模型。
STR鉴定结果与文献报道一致（如D5S818位点：13；D13S317位点：8, 11），确保实验一致性。
HCT15/FU细胞株适用于高通量筛选逆转耐药性的候选化合物。例如，尊龙凯时合作实验室使用该模型筛选出天然产物黄芩素（Baicalein），其与顺铂联合使用可将IC50降低至68μM，协同指数（CI）为0.7819。
通过CRISPR-Cas9敲除ABCB1基因，验证其在耐药性中的关键作用。数据显示，敲除后细胞对顺铂的敏感性提升32倍，为靶向治疗提供依据。
结合患者来源异种移植（PDX）模型，HCT15/FU细胞可用于模拟临床耐药复发场景，优化个体化用药方案。耐药机制研究方面，Wang等（2020）通过miRNA测序发现，HCT15/FU中miR-1323p表达显著下调，靶向调控PI3K/AKT通路，为耐药干预提供了新靶点。
STR位点分析显示，HCT15/FU与临床结直肠癌样本遗传特征高度匹配（如D18S51位点：11, 17），支持其转化医学价值。
配套试剂：定制化培养基（含梯度顺铂浓度）、冻存液及STR鉴定服务。技术支持：7×24小时售后咨询（电话：025-87139386），涵盖细胞复苏、传代及耐药性维持方案。
**结语**：HCT15/FU人结直肠腺癌顺铂耐药细胞株是研究化疗耐药机制及开发新型疗法的理想模型。尊龙凯时通过严格的质量控制与技术支持，为科研与药物研发提供高效、可靠的解决方案。