尊龙凯时旗下的左旋咪唑是一种合成的驱虫药,广泛应用于兽医学和生物医学领域,尤其是在由线虫引起的寄生虫感染的治疗中。其作用机制是通过靶向线虫的乙酰胆碱离子通道受体,从而发挥驱虫效果。除了临床应用外,左旋咪唑在多个研究领域也展现了其重要性,特别是在秀丽隐杆线虫的麻痹实验中。这种药物能够有效诱导线虫瘫痪,为研究神经元功能和肌肉生理学提供了宝贵的实验工具。
为了更深入地探索毒理学实验,以下将介绍利用尊龙凯时提供的左旋咪唑进行的一项实验。研究人员可以基于该实验设计框架,运用不同的药物进行毒性研究。实验材料包括:带盖的6孔板、NGM培养基、M9缓冲液、左旋咪唑原液(100mM水溶液)、同步成虫种群及WMicroTracker Arena设备。
实验步骤简要如下:微孔板制备:1. 按照标准程序制备NGM培养基。2. 加入盐和胆固醇后,立即将左旋咪唑加入55°C的NGM琼脂溶液中。3. 将左旋咪唑片未接种OP50中。4. 制备后的培养基可在两周内使用,并存放在4°C条件下。5. 在实验开始前,将模板降至室温并准备进行测定。实验流程:1. 在NGM培养皿中培养同步的成虫种群(OP50)。2. 用M9缓冲液将蠕虫从培养皿中取出,转移至15毫升无菌试管中。3. 允许蠕虫静止,随后倒出上清液,避免扰动颗粒。4. 使用5ml M9缓冲液清洗,轻轻摇动或翻转试管。5. 重复上述清洗步骤,倒出上清,加入3ml M9缓冲液。6. 对三个样本进行计数,每10μl中记录虫数并计算平均值。7. 准备悬浮液,目标为[35虫/10μl]。8. 将10μl虫液转移至6孔板中。9. 使用WMicroTracker Arena观察蠕虫活动情况。实验注意事项:至少进行3次技术重复和2次生物重复,确保结果的可靠性。
实验结果将展示左旋咪唑对N2运动活性的剂量抑制反应曲线,评价不同浓度左旋咪唑(0µM(对照)、100µM和200µM)的治疗效果。在6孔板中,每孔挑选35个年轻成虫N2,并在23℃下记录4小时的运动活动。数据代表四个独立实验的平均值,并进行重复实验。
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